Formada pela Escola de Arte Dramática da USP, Magali Biff coleciona inúmeros trabalhos em teatro, cinema e TV. Com mais de três décadas de carreira, a atriz subiu aos palcos em espetáculos como Fim (2019), Selvageria (2017), A Tragédia e a Comédia Latino-Americana (2016), Puzzle (2013) – todos sob a direção de Felipe Hirsch –, A Procura de Emprego (2018), dirigida por Jean-Claude e Rubens Rewald, e As Criadas (2017), direção de Radoslaw Rychcik, entre outros.
Em 1994, conquistou o Prêmio Shell de Melhor Atriz por sua atuação em K, adaptação do texto de Peter Handke, Kaspar – prêmio ao qual já havia sido indicada por Boneca do Barco (1999), Esperando Godot (2006) e Educação Sentimental do Vampiro (2007), de Dalton Trevisan.
Em 2018, dirigiu a peça Nos Países de Nomes Impronunciáveis, inspirada no livro de Paula Autran, e também Fellini & Nino Rota em Concerto.
Na TV, Magali Biff ficou conhecida do grande público na primeira versão de Chiquititas (SBT), quando interpretou as irmãs gêmeas Ernestina e Matilde. Na Rede Globo, atuou no sucesso Amor de Mãe.
Para o streaming, integra o elenco das séries Rota 66, Os Outros, Onde Está Meu Coração – todas do Globoplay –, Unidade Básica (Universal Channel), Psi – 4ª temporada (HBO), A Garota da Moto (SBT) e Lendas Urbanas (Record).
Os trabalhos da atriz para o cinema incluem curtas e longas-metragens como Deserto (2016), Açúcar (2017), Pela Janela (2017) – pelo qual foi indicada ao Prêmio Guarani de Cinema Brasileiro na categoria Melhor Atriz no Papel Principal –, O Menino Pássaro (2018) e os recentes A Felicidade das Coisas (2021) e Enterrem Seus Mortos (2022).